北京华科盛精细化工产品贸易有限公司生产销售电泳缓冲液:
电泳缓冲液是核酸 、蛋白质 凝胶电泳系统 的一个重要组成, 是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件 。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率 ,应避免与被分离的样 品发生化学反应 而改变样品的理化性质 或使 其丧失生物活性 。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子 ,防止电泳时激 活DNA酶 及Mg离子与核酸生成沉淀。 [1]
中文名电泳缓冲液释 义进行分子电泳时所使用的缓冲溶液作 用稳定体系酸碱度 常见缓冲液TAE、TBE、TPE和MOPS等隶 属核酸 、蛋白质凝胶电泳系统特 点使用广泛。
作用
缓冲液 在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时阳极与阴极都会发生电解反应,阳极发生的是氧化反应 (4OH--4e->2H2O+O2),阴极发生的是还原反应 (4H++4e->2H2),长时间的电泳将使阳极变酸,阴极变碱。一个好的缓冲系统 应有较强的缓冲能力 ,使溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性 ,以利于DNA分子 的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L 的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢 ;太高时就会造成过大的电流使胶发热 甚至熔化。
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA ,加入浓度为1-2mmol /L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶 ,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
特点
TAE 是使用最广泛的缓冲系统 。其特点是超螺旋 在其中电泳时更符合实际相对分子质量 (TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链 线状DNA 在其中的迁移率 较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液 将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量 小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。
TBE的特点是缓冲能力 强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶 时易造成高电渗 作用,并且因与琼脂糖 相互作用生成非共价 结合的四羟基硼酸盐 复合物而使DNA片段的回收率 降低,所以不宜在回收电泳中使用。
TPE的缓冲能力也较强,但由于磷酸盐 易在乙醇 沉淀过程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的电泳中使用。
...